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应用中心 —— 双光子/三光子显微

在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子。配合相应波长的荧光染料或荧光蛋白则可实现双光子荧光显微。双光子显微镜的优势在于:

1. 漂白局限于焦点处:因为荧光激发只发生在物镜的焦点上,所以相对于激光共聚焦显微技术就不需要共聚焦针孔了。这样提高了光的检测,而且光漂白只发生在焦点上。焦点外的光漂白和光损伤很小。

2. 提高信噪比。激发光波长和发射光波长具有很大的差别,提高了信噪比 。

3. 更容易穿透标本:红外波长的光不易被细胞散射,能穿透更深的标本。 


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